Otoklavların sterilizasyon etkinliği doğrulaması

Bir mikrobiyoloji laboratuvarının en önemli enstrümanlarından biri, otoklavın (yüksek basınçlı buhar sterilizatörü) en yaygın olarak kullanılan sterilizatördür. GB 4789.1-2016'ya göre, laboratuvar ekipmanı düzenli olarak denetlenmeli ve/veya kalibre edilmeli (muayene etiketleriyle), korunmalı ve uygun performans ve operasyonel güvenliği sağlamak için servis edilmelidir. Ancak otoklavınız bu tür denetimlere uğradı mı? Ve eğer doğrulama yapmak istiyorsanız, bunu nasıl yapmalısınız? Bugün, otoklavların sterilizasyon etkinliğini doğrulamak için temel yöntemleri özetleyeceğiz.

Otoklav sterilizasyon etkinliğinin doğrulanması genellikle kimyasal gösterge, maksimum termometre, kendi kendine yapılan sıcaklık tüpü ve biyolojik gösterge gibi yöntemleri içerir. Bu yöntemler benzer ilkeleri paylaşsa da - büyük ölçüde sterilizatörün sterilizasyon sırasında gerekli sıcaklığa ulaşıp ulaşmadığını doğrulayan - laboratuvarınızın özel koşullarına göre bir veya daha fazla seçebilirsiniz.

1. Kimyasal gösterge yöntemi

Prensip: Kimyasal göstergeler belirli sıcaklık ve zaman koşulları altında bir renk veya şekil değişikliğine uğrar. Bu değişiklik sterilizasyon parametrelerinin karşılanmadığını belirlemek için kullanılır.

Laboratuvarlarda yaygın olarak kullanılan bir öğe, sterilizasyondan sonra rengi değiştiren 3M Autoclave gösterge bandıdır. Bant, yapışkan bant üzerinde bir şerit deseninde basılan termosensitif kimyasallardan, renk geliştiricilerden ve boya malzemelerinden yapılmıştır. Minimum uzunluk 5 cm ile doğrudan sterilizasyon paketinin dışına uygulanır. İyi yapışma ve sızdırmazlık sağlamak için banta hafifçe basın. 121 ° C'ye 20 dakika veya 4 dakika boyunca 130 ° C'ye maruz kaldıktan sonra, banttaki diyagonal beyaz çizgiler tamamen siyaha dönmelidir. Renk değişikliği düzensiz veya eksikse, paket uygun şekilde sterilize edilmez.

2. Maksimum termometre yöntemi

Prensip: Bu yöntem, geleneksel bir tıbbi termometreye benzer şekilde ısıtıldıktan sonra daha düşük bir sıcaklığa geri dönmeyen bir cıva termometresi kullanır. Sterilizasyon sırasında ulaşılan maksimum sıcaklığı gösterir.

Doğrulama için cıva termometresini su dolu bir Erlenmeyer şişesine yerleştirin. Sterilizasyon sırasında, şişeyi otoklavın üst ve alt bölümlerine yerleştirin. İşlemden sonra, termometrenin okumasının gerekli sıcaklıkla eşleşip eşleşmediğini kontrol edin. Bu yöntem sadece sıcaklığı doğrulayabilir ve sterilizasyon süresi gereksiniminin karşılanmadığını doğrulayamaz, bu nedenle otoklav doğrulaması için minimum standardı temsil eder.

3. Kendi kendine yapılan sıcaklık tüpü yöntemi

Prensip: Bu yöntem, soğutma sonrası ayırt edici kristal formları ile belirli sıcaklıklarda eriyen ve yeniden kristalize eden belirli kimyasalları kullanır. Bu kimyasallar küçük cam tüplere kapatılır ve otoklavın içine yerleştirilir. Sterilizasyondan sonra, kristal şekli doğru sıcaklığa ulaşılıp ulaşılmadığını belirlemek için incelenir.

Benzoik asit, otoklavın standart sterilizasyon sıcaklığı ile hizalanan 121-123 ° C'lik bir erime noktası ile yaygın olarak kullanılır. Katı benzoik asit, küçük cam tüplere kapatılır ve otoklava yerleştirilir. Sterilizasyondan sonra, benzoik asidin durumunun, hedef sıcaklığın elde edilip edilmediğini doğruladığı gözlenir. Maksimum termometre yöntemi gibi, bu yaklaşım sterilizasyon süresini değil, sadece sıcaklığı doğrular.

4. Biyolojik gösterge yöntemi

Prensip: Bu yöntem, termal sterilizasyonun etkinliğini değerlendirmek için gösterge organizmaları olarak geobacillus stearothermophilus'un patojenik olmayan sporlarını kullanır. Bu sporlar, patojenik Clostridium botulinum sporlarına benzer şekilde dirençle oldukça ısıya dayanıklıdır, bu da onları sterilizasyon etkinliğini doğrulamak için uygun göstergeler haline getirir.

Biyolojik göstergeler üç formda mevcuttur: spor süspansiyonları, spor şeritleri ve entegre spor ve orta tüpler. Bunlar tipik olarak sterilizasyon kabında beş yere yerleştirilir: alt tabakanın ön, orta ve arkası ve üst ve orta katmanların merkez noktaları. Sterilizasyondan sonra, göstergeler bromokresol mor-glikoz-pepton suyuna aşılanır ve 55-60 ° C'de 2-7 gün inkübe edilir. Ortam net kalır ve renkli olarak değişmezse, sporlar öldürüldü, bu da iyi sterilizasyon gösterdi. Ortam sarı ve bulanıklaşırsa, sporlar hayatta kaldı ve zayıf sterilizasyon performansı olduğunu düşündürdü. Hem spor süspansiyonları hem de spor şeritleri aynı doğrulama sürecini izler.

Ticari biyolojik gösterge tüpleri de laboratuvarlarda yaygın olarak kullanılır. Geobacillus stearothermophilus sporları ve büyüme ortamına sahip kapalı bir cam ampou içerirler. Tüpler sterilizasyon kabı boyunca yerleştirilir. Otoklavülden sonra, cam ampou ortamı serbest bırakmak için ezilir ve tüp, pozitif bir kontrolün yanında 56 ° C'de inkübe edilir. Sterilizasyon yetersizse, hayatta kalan sporlar büyüyecek ve suyunu sarar. Sterilizasyon etkili ise, sporlar inaktive edilir ve et suyu mor kalır.

Doğrulama frekansı

Şu anda, otoklav etkinliği doğrulaması sıklığı konusunda katı bir ulusal standart yoktur. Laboratuvarların kendi doğrulama programlarını oluşturmaları ve onlara kesinlikle yapışmaları beklenmektedir. Hem kullanım kolaylığı hem de sonuçların güvenilirliği göz önüne alındığında, basit bir çalışma ve sterilizasyon etkinliğinin kapsamlı bir şekilde doğrulanmasını sundukları için biyolojik gösterge tüpleri ile birlikte gösterge bandı kullanmanızı öneririz.

Sterilizasyon ile ilgili notlar (bazı ithal tam otomatik otomatik otoklavlar için gerekli değildir)
Yüksek basınçlı bir buhar sterilizatörü kullanılırken, buhar salındığında oda içindeki tüm soğuk havayı dışarı atmak çok önemlidir. Egzoz valfi kapatılmalıdır, ancak tüm soğuk hava çıkarıldıktan sonra. Herhangi bir hava kalırsa, basınç göstergesi doğru basıncı gösterebilir, ancak odadaki gerçek sıcaklık yetersiz kalacaktır. Hava ne kadar çok tutulursa, basınç ve sıcaklık arasındaki tutarsızlık o kadar artar, bu da potansiyel olarak eksik sterilizasyona neden olur. (Bu genellikle hava kabarcıklarının küçük kılavuz tüplerde kaldığı fermantasyon ortamının sterilizasyonu sırasında gözlenir - soğuk havayı daha iyi tüketmeye çalışın.) .